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BUNSEN本生為您詳解、細(xì)胞培養(yǎng)基知識大全
一、細(xì)胞培養(yǎng)基發(fā)展歷史
細(xì)胞體外培養(yǎng)初期使用的培養(yǎng)基,都是天然培養(yǎng)基,也就是組織提取物或者體液,如血漿、血清、淋巴液、胚胎浸出液等,直到20世紀(jì)50年代Parke、Eagle等人,設(shè)計出化學(xué)成分明確的合成培養(yǎng)基:MEM培養(yǎng)基和DMEM培養(yǎng)基,這兩種培養(yǎng)基直到現(xiàn)在還被人們廣泛使用。在此基礎(chǔ)上,科學(xué)家們發(fā)現(xiàn),在合成培養(yǎng)基中添加血清,可以使細(xì)胞維持更高的活細(xì)胞密度和更長的培養(yǎng)時間。隨著血清成分的不斷明確,科學(xué)家們逐步開始研發(fā)無血清培養(yǎng)基,減少血清對細(xì)胞培養(yǎng)的影響。
二、細(xì)胞培養(yǎng)基組成成分及功能
1、氨基酸
氨基酸是培養(yǎng)基中主要的氮源物質(zhì),也是重要的能源物質(zhì)。
2、維生素
一般培養(yǎng)基中含有的維生素有:①脂溶性維生素:如A、D、E、K等;②水溶性維生素:如B、C、葉酸、煙酰胺等。培養(yǎng)基中添加維生素可以適合更多細(xì)胞系的生長。
3、無機(jī)鹽
無機(jī)鹽是維持培養(yǎng)基滲透壓平衡的主要物質(zhì),它還可以調(diào)節(jié)細(xì)胞膜功能,無機(jī)鹽主要包括:Ca2+、Mg2+、Cl-、Na+、K+等。
4、碳水化合物
細(xì)胞培養(yǎng)基中的碳水化合物通常被用作細(xì)胞的能量來源,常用的有葡萄糖、丙酮酸鈉等。
5、脂類
脂類物質(zhì)作為有機(jī)能量的來源,可以滿足細(xì)胞新陳代謝的需求,也可以支持細(xì)胞生長和存活,培養(yǎng)基中的脂類物質(zhì)主要有:膽固醇、乙醇胺、亞油酸等。
6、激素
激素類物質(zhì)主要包含:胰島素、生長激素、腎上腺素等,可以促進(jìn)細(xì)胞生長、提高細(xì)胞增殖能力,
7、微量元素
細(xì)胞培養(yǎng)基中微量元素主要有:銅、錳、鋅、硒等,這些微量元素對細(xì)胞無蛋白長期穩(wěn)定培養(yǎng)具有重要作用。
8、特殊添加物
蛋白水解物、酵母水解物等這些特殊添加物可以起到抗氧化劑、抗剪切劑、刺激抗體表達(dá)等作用。
9、緩沖體系
通常細(xì)胞培養(yǎng)基中會添加HEPES、磷酸鹽等緩沖物質(zhì),可以調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH、滲透壓等。
三、培養(yǎng)基種類
1、BME細(xì)胞培養(yǎng)基:適用于各種傳代細(xì)胞系。
2、MEM細(xì)胞培養(yǎng)基:適合多種細(xì)胞單層生長。
3、DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基:根據(jù)葡萄糖含量可以分為低糖和高糖2種類型,低糖適用于培養(yǎng)貼壁依賴性細(xì)胞,高糖適用于高密度懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。
4、DMEM/F12細(xì)胞培養(yǎng)基:適用于原代細(xì)胞培養(yǎng)及難培養(yǎng)細(xì)胞。
5、M199細(xì)胞培養(yǎng)基:適用于培養(yǎng)多種種屬來源的細(xì)胞及能轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。
6、IMDM細(xì)胞培養(yǎng)基:適用于高密度細(xì)胞的快速增殖培養(yǎng)。
7、RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基:適用于懸浮細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等細(xì)胞培養(yǎng)。
8、HamF10細(xì)胞培養(yǎng)基:適用于克隆化培養(yǎng)。
9、McCoy5A細(xì)胞培養(yǎng)基:適用于原代細(xì)胞培養(yǎng)、淋巴細(xì)胞培養(yǎng)以及一些難培養(yǎng)的細(xì)胞。
10、L15細(xì)胞培養(yǎng)基:適用于快速增殖的腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)。
四、培養(yǎng)基保存方法
1、液體培養(yǎng)基
液體培養(yǎng)基應(yīng)于2-8℃冰箱保存,實驗前放入37℃預(yù)熱。
2、干粉培養(yǎng)基
2-8℃冰箱避光保存。
細(xì)胞培養(yǎng)基 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。
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